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자연과학 다운로드 일반성분 분석법 - 조단백질 (Crude Protein)

[자연과학] 일반성분 분석법 - 조단백질 (Crude Protein)

1. 제 목(Title) : 일반성분 분석법 - 조단백질 (Crude Protein)

2. 목 적(Purpose) : Crude Protein의 정확한 의미를 알고 단백질량을 구해본다.

Weende법의 단백질 함량측정은 단백질량을 직접 구하는 것이 아니고 질소를 측정하는 것으로 이 값에 단백질 계수를 곱하여 구하는 것이다. 즉 사료중의 단백질 속에는 질소가 존재하며, 이 질소는 단백질 중 16%를 차지한다는 가정하에서 질소함량을 구한 후 100/16 즉 6.25를 곱하여 단백질함량을 곱하게 되는데, 사료내에는단백질속에만 질소가 존재하는 것이 아니고 단백질이 아닌 amide, ammonia, urea, buret 등 여러 종류의 NPN이 포함되어 있기에 진정한 true protein의 값이 아니므로 crude라는 말을 붙였다. 일부 문헌에는 C. protein이라는 말 대신 N X 6.25로 표시하는 예도 있다. 그러나 사료에 따라 단백질 중 질소의 함량이 반드시 16%는 아니기 때문에 사료에 따라 곱해주는 값이 달라진다.

3. 원리 및 방법(Principle & Methods)

(1) 원리(Principle) : Kjeldahl 방법을 사용하였다.

분해(소화) 2NH3+H2SO4 (NH4)2SO4

증류 (NH4)2SO4+2NaOH Na2SO4+2NH3+2H2O

NH3+HBO2 NH4BO2

적정 NH4BO3+HCl NH4Cl+HBO2

(2) 시약 및 기구(Apparatus & Reagents) :

Kjeldahl 기구, 750ml kjeldahl flask, 500ml 삼각 flask, Burette, Beaker, CuSO4와 K2SO4(1:8), Zn granule, Bolic acid, 40% NaOH, Bromocresol, Methyl red, Alcohol, HCl, Na2CO3 또는 KHCO3, H2SO4(3) 방법(Flow chart)

① Sample 0.5g + H2SO4 20ml + catalyst 10g 정도를 1시간 정도 소화시킨다.

② ①을 25℃까지 방냉한 후 증류수 250ml를 넣는다.

③ ②과정을 하는 동안 4% bolic acid (ammonia gas의 증기압을 감소시킴으로써 ammonia gas를 잡기 위하여)와 mixed indicator를 미리 준비한다.

④ Bumping을 방기하기 위하여 ②에 Zn granule을 넣고 40% NaOH 55ml을 넣는다. - 이번 실험에서는 Zn granule넣는 것을 생략함

⑤ ④를 1시간 정도 증류시킨다. (cold water를 지나치게)

⑥ 액화된 NH3가 모두 ③과정에서 만든 물질에 다 모은다. (약 250ml 정도)

⑦ 0.1 HCl로 ⑥에 있는 N 함량을 적정법으로 측정한다.

4. 결 과(Results)

조단백질(%) =

A : 시료 적정에 소요된 0.1 N-HCl용액의 ml수

B : blank test에 소요된 0.1 N-HCl용액의 ml수

Factor : 0.1 N-HCl용액의 factor = 1

W : 시료의 무게

실험1. 조단백질(%) = = 19.25%

실험2. 조단백질(%) 18.55%

평균 = (19.25+18.55)/2 = 18.9%

5. 고찰 및 비고

-증류를 시키면서 얻은 암모니아가 붉은색을 띄는 약산성 지시약을 청록색을 띄게 변하였다. 이것을 가지고 HCl을 조금씩 넣어가면서 N함량을 적정법으로 측정해 보았는데 HCl을 넣을 때는 auto pipet을 사용해서 한 방울씩 넣었다. HCl이 잘 섞이게 하기 위해서 비커 속에 자석을 넣고 자기장을 주어 돌아가게 하는 실험장치를 사용하여 계속 섞어주었다. HCl을 넣어보면 청록색에서 순간적으로 회색을 띄었다가 다시 붉어지는 지점이 있다. 이 지점은 순간적으로 일어나기 때문에 잘 지켜봐야 한다.

-염류와 산을 섞을 때는 암모니아가 날라갈 수 있으니 빨리 해야한다.

-Factor란 어떤 용액을 만들었을 때 그것의 농도가 원하던 것과 어떻게 다른가를 나타내는 것으로 화학실험에서 factor은 보정계수로 정확한 실험값을 구하기 위해사용된다. 즉 실험에 사용한 적정용액의 농도를 보정해주기 위해 사용합니다.F=1일 경우 똑같다는 것이고, F`1이면 너무 진하게 만든 것, F`1이면 너무 묽게 만든 것을 뜻한다.

-참고자료-

http://blog.naver.com/joinourRedirect=Log&logNo=90122823178

http://kin.naver.com/qna/detail.nhnd1id=11&dirId=1115&docId=58281989&qb=7Jqp7JWhIGZhY3Rvcg&enc=utf8§ion=kin&rank=2&search_sort=0&spq=0&pid=R7ywwU5Y7tVssamOhtGsssssssw-229484&sid=ULyvuXJvLDcAAAyJj98

http://blog.naver.com/x3821Redirect=Log&logNo=50131441016

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파일종류 : HWP 파일

자료제목 : 자연과학 다운로드 일반성분 분석법 - 조단백질 (Crude Protein)

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